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    Avivasysbio服務(wù)

    發(fā)布時(shí)間: 2022-09-19  點(diǎn)擊次數(shù): 1329次

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    Avivasysbio  高通量抗體表征服務(wù)

    基于抗體的療法構(gòu)成了當(dāng)今藥物發(fā)現(xiàn)研究的主要部分。然而,作為藥物或診斷劑的抗體存在重大的分析挑戰(zhàn),因?yàn)榭贵w是大、復(fù)雜和異質(zhì)的分子。表面等離子共振 (SPR) 是一種強(qiáng)大的分析技術(shù),非常適合分析和表征抗體。SPR 可用于測量抗體-抗原結(jié)合動力學(xué),進(jìn)行表位組合和表位作圖。后者可用于識別抗體對以開發(fā)高精度 ELISA 或多重檢測。Aviva Systems Biology 將數(shù)十年的抗體和 ELISA 研究專業(yè)知識與創(chuàng)新的 Carterra LSA 相結(jié)合,以提供高通量抗體表征服務(wù)。

     

    使用 Carterra LSA 進(jìn)行抗體表征的好處

     

    高通量:同時(shí)對多達(dá) 1,152  mAb384 個克隆進(jìn)行動力學(xué)篩選和排序

     

    樣品用量少:每種相互作用物僅需 < 200µl

     

    易于使用:簡單的樣品布局無需復(fù)雜的板圖和每種試劑的多個等分試樣

     

    快速數(shù)據(jù)分析:強(qiáng)大的軟件工具使大型數(shù)據(jù)集能夠快速擬合和可視化,并根據(jù)多個數(shù)據(jù)質(zhì)量參數(shù)自動驗(yàn)證

     

    詳細(xì)的數(shù)據(jù)挖掘:通過交互式 on-rate、off-rateaffinity  iso-affinity 圖詢問 mAb 面板

     

    數(shù)據(jù)集成:結(jié)合分級和動力學(xué)篩選數(shù)據(jù),進(jìn)行 mAb 評估

     

    Aviva 提供以下抗體鑒定服務(wù):

    抗體鑒定服務(wù)

    下載 AACR 2022 海報(bào)

    篩選與動力學(xué)表位作圖和分箱

    篩選與動力學(xué)

    Aviva 了解與抗體庫篩選相關(guān)的挑戰(zhàn)。利用 Carterra LSA 可以一次對多達(dá) 384 種抗體進(jìn)行高通量篩選。

    使用高通量 SPR  384 種抗原/抗體結(jié)合相互作用進(jìn)行同時(shí)動力學(xué)分析

    篩選與動力學(xué)

    (左)單次捕獲動力學(xué)測定的結(jié)果,其中單價(jià)靶標(biāo)(分析物)在 384 種抗體上進(jìn)行滴定,每種抗體都被捕獲到 384 陣列的各個點(diǎn)上。每個面板代表單個點(diǎn)的全局動力學(xué)分析;平行分析所有 384 個點(diǎn)(排除一些點(diǎn))。

     

    (下)個點(diǎn)的數(shù)據(jù)放大視圖,顯示抗體以不同的動力學(xué)(低、中和高親和力,從左到右)結(jié)合其靶標(biāo)。

    定制抗體

    多克隆IgY | 多克隆IgG | 磷特異性單克隆 IgY | 單克隆 IgG

     

     

    定制抗體服務(wù)

    Aviva 提供定制抗體服務(wù)。我們的團(tuán)隊(duì)擅長生產(chǎn)高質(zhì)量抗體的兩個關(guān)鍵因素:抗原設(shè)計(jì)和抗體純化。服務(wù)包括多克隆 IgY、多克隆 IgG、磷酸特異性抗體、單克隆 IgY、雜交瘤開發(fā)和單克隆 IgG 生產(chǎn)。如果您想獲得報(bào)價(jià)或安排電話討論您的需求,請使用我們方便的在線抗體開發(fā)報(bào)價(jià)表。

     

     

    聯(lián)系我們并在 24 小時(shí)內(nèi)收到報(bào)價(jià)。   

     

    多克隆IgY多克隆IgG磷特異性單克隆 IgY單克隆 IgG

    多克隆 IgY 抗體開發(fā)

    英杰華是全球有經(jīng)驗(yàn)的IgY抗體公司之一,提供從基因序列到抗體純化的完整抗體生產(chǎn)服務(wù)。英杰華的抗體生產(chǎn)服務(wù)是一站式的方位服務(wù):了解客戶的具體需求,按時(shí)生產(chǎn)和交付產(chǎn)品,并提供交付后的技術(shù)支持。我們尊重客戶的機(jī)密信息,并保證所有知識產(chǎn)權(quán)歸客戶所有。

     

    這是我們用于 IgY 定制抗體開發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)方案:

     

    概述

    動物 白來亨雞

    免疫原    典型的蛋白質(zhì)和結(jié)合肽

    佐劑 最初完成弗氏佐劑 (CFA)。所有后續(xù)注射的不*弗氏佐劑 (IFA)

    日程

    周:1      通過與客戶的交互進(jìn)行域選擇

    周:2-3   表達(dá)載體和抗原制備

    周:4-11 免疫和抗體分離

    周:12-13      抗原親和純化和 QC 驗(yàn)證

    周:14    數(shù)據(jù)表準(zhǔn)備和產(chǎn)品交付

    筆記

    雞一般每月產(chǎn)15-20個蛋。

    每個蛋黃(每個雞蛋約 15 毫升)含有約 50-100 毫克總 IgY 抗體。

    此外,了解有關(guān)我們符合 ISO13485 標(biāo)準(zhǔn)的抗體開發(fā)、驗(yàn)證和生產(chǎn)的更多信息。

     

    多克隆 IgG 抗體開發(fā)

    英杰華擁有超過15年的兔多克隆IgG生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),提供從基因序列到抗體純化的完整抗體生產(chǎn)服務(wù)。英杰華的抗體生產(chǎn)服務(wù)是一站式的方位服務(wù):了解客戶的具體需求,按時(shí)生產(chǎn)和交付產(chǎn)品,并提供交付后的技術(shù)支持。我們尊重客戶的機(jī)密信息,并保證所有知識產(chǎn)權(quán)歸客戶所有。

     

    有多種方案和時(shí)間表可用于抗體生產(chǎn)。每個協(xié)議都旨在滿足客戶的時(shí)間表、預(yù)算、質(zhì)量和規(guī)格。

     

    這是我們用于 IgG 定制抗體開發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)方案:

     

    概述

    動物 新西蘭白兔

    免疫原    典型的蛋白質(zhì)和結(jié)合肽

    佐劑 最初完成弗氏佐劑 (CFA)。所有后續(xù)注射的不*弗氏佐劑 (IFA)

    此外,了解有關(guān)我們符合 ISO13485 標(biāo)準(zhǔn)的抗體開發(fā)、驗(yàn)證和生產(chǎn)的更多信息。

     

    磷酸化特異性抗體開發(fā)

    產(chǎn)生磷酸化特異性抗體的關(guān)鍵是設(shè)計(jì)特異性和免疫原性抗原。Aviva 已成功生產(chǎn)出特定于研究科學(xué)家感興趣的磷酸化位點(diǎn)的磷酸化特異性抗體。Aviva 的磷酸化特異性抗體開發(fā)服務(wù)包括以下步驟:

     

    抗體設(shè)計(jì)和肽合成:

    磷酸化特異性抗體的常見抗原是帶有一個或兩個磷酸化殘基等合成肽。客戶提供有關(guān)所需磷酸殘基及其側(cè)翼序列的信息,然后 Aviva 將設(shè)計(jì)磷酸肽。將合成兩種肽,一種磷酸肽和一種非磷酸肽。

     

    抗體生成:

    抗體生產(chǎn)將利用 Aviva 在生產(chǎn)多克隆抗體方面的專業(yè)知識。將制備和進(jìn)一步純化來自蛋黃的抗體(或血清中的 IgG)。

     

    磷特異性純化:

    用磷酸肽免疫可能產(chǎn)生兩種不同類型的抗體

    :磷酸特異性抗體。

    灣。針對非磷酰多肽的泛特異性抗體。

     

    兩個抗原親和柱將用于純化磷酸特異性抗體和泛特異性抗體。第一個使用的色譜柱是非磷酸肽親和色譜柱。識別肽的非磷酸化殘基的抗體將與柱結(jié)合并作為泛特異性抗體被洗脫。流通部分包含非特異性抗體和對磷酸化殘基具有特異性的抗體。然后將收集的流過部分應(yīng)用于第二個柱,即磷酸肽柱。識別磷酸化殘基的抗體將與柱結(jié)合,然后作為磷酸化特異性抗體被洗脫。非特異性抗體將作為流通物去除。

     

    抗體表征

    初始 ELISA 表征將測試兩種產(chǎn)品對每種底物的交叉反應(yīng)程度。一般來說,與靶向磷酸化肽相比,非磷酸化肽的結(jié)合率應(yīng)低于 0.1%。隨后的測試可能涉及WBIHC、ICC等,用于分析產(chǎn)生的抗體,使用可用的細(xì)胞系或客戶提供的樣本。Aviva 將與客戶合作設(shè)計(jì)免疫原序列并制定具體的項(xiàng)目方案。每個項(xiàng)目都提供磷酸特異性和泛特異性抗體、抗原樣本、免疫前血清和總抗體。

     

    Aviva 將與客戶合作設(shè)計(jì)免疫原序列并制定具體的項(xiàng)目方案。每個項(xiàng)目都提供磷酸特異性和泛特異性抗體、抗原樣本、免疫前血清和總抗體。

     

    IgY 單克隆抗體開發(fā)

    Aviva Systems Biology 擁有多年開發(fā) scFv  IgY 抗體的經(jīng)驗(yàn)。雞 IgY scFv 片段結(jié)合了雞 IgY 多克隆抗體、單克隆抗體和 scFv 重組抗體的優(yōu)點(diǎn)。

     

    重組 scFv 單鏈抗體在治療和診斷行業(yè)越來越受歡迎。scFv 抗體的優(yōu)勢包括:

     

    更高的特異性

    通過隨機(jī)誘變進(jìn)行克隆選擇后的可變親和力

    高度可擴(kuò)展的制造——片段在細(xì)菌中表達(dá)并使用常規(guī)蛋白質(zhì)標(biāo)簽進(jìn)行純化

    由于不存在不變區(qū)域,交叉反應(yīng)性較低

    一致性和可重復(fù)性

     

     

    我們開發(fā) scFV 抗體的一般流程如下:

    抗原是使用生物信息學(xué)分析和我們專有的融合域和載體制備的。免疫雞并分析多克隆抗體以指示宿主的免疫反應(yīng)。一旦鑒定出具有*佳免疫反應(yīng)的雞,就會分離出其 B 細(xì)胞,并制備總 RNA???/span> RNA 稍后用于 cDNA 文庫生成和隨后的噬菌體文庫制備。選擇陽性克隆并在大腸桿菌中表達(dá) scFv 片段。

     

    流程總結(jié)

    多克隆IgY的免疫和純化

    IgY 片段編碼 cDNA 制備

    噬菌體文庫構(gòu)建

    噬菌體文庫篩選

    大腸桿菌中的抗體表達(dá)

    抗體表征

    IgG單克隆抗體開發(fā)

    Aviva Systems Biology 在單克隆抗體的開發(fā)和生產(chǎn)方面擁有超過 15 年的經(jīng)驗(yàn)。我們經(jīng)驗(yàn)豐富的科學(xué)團(tuán)隊(duì)將努力設(shè)計(jì)一個方案,以滿足您對研究、產(chǎn)品開發(fā)或臨床或 IVD 使用的需求。

     

    標(biāo)準(zhǔn)雜交瘤開發(fā)說明

     

    一、免疫

    購買 5  Balb/C 小鼠或 3  Fisher 大鼠

    陰性基線的免疫前測試出血

    免疫和測試出血

    ELISA測試出血的抗體滴度

    選擇具有*佳滴度的一只或兩只小鼠或大鼠進(jìn)行融合

    融合前的預(yù)脾收集增強(qiáng)

    通常為 70 – 90 天,具體取決于抗原和免疫反應(yīng)

     

     

    二、融合與選擇

    匯集并融合來自 2 只小鼠或 1 只大鼠的淋巴細(xì)胞。

    融合細(xì)胞在 HAT 選擇性單步克隆培養(yǎng)基上生長。

    將克隆轉(zhuǎn)移至 96 孔板并擴(kuò)增。

    10 - 14 

     

     

    三、雜交瘤克隆的篩選和擴(kuò)增

    通過間接ELISA初步篩選雜交瘤組織培養(yǎng)上清液。

    通過ELISA進(jìn)一步測試陽性克隆。

    對陽性克隆進(jìn)行同種型和亞克隆以鑒定穩(wěn)定表達(dá)的克隆。

    如果需要,由客戶進(jìn)行進(jìn)一步評估(將上清液運(yùn)送給客戶)。

    向客戶報(bào)告

    14 - 21 

     

     

    四。亞克隆和冷凍保存

    與客戶一起選擇 1  5 個克隆。

    每個選定克隆至少冷凍保存 5 個小瓶。

    樣品瓶可免費(fèi)存放 3 個月。

    可長期儲存(可選)。

    向客戶報(bào)告

    14 - 21 

     五、抗體生產(chǎn)與純化(選修)

    Aviva 提供抗體生產(chǎn)和純化服務(wù),以滿足研究、診斷開發(fā)或用于 FDA  CE 醫(yī)療設(shè)備的需求

     

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    其他的這些是菌株

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