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Transnetyx北京試劑
產(chǎn)品時間:2023-04-20
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文化媒體

1.培養(yǎng)基(Neurobasic®/B27®/GutaMAX)有多長™) 穩(wěn)定的

我們的培養(yǎng)基在4攝氏度的黑暗中保存長達6個月。為了防止氧化,介質(zhì)可以等分成更小的體積,并在4攝氏度下儲存。

2.我需要多長時間進行一次媒體交流?

我們每34天更換1/2的培養(yǎng)基,但這在一定程度上取決于細胞密度。請參閱INVITROGENLTI)焦點16:6。如果細胞密度高于500/mm2,則每2天改變1/2。

3.NbActiv1NbActiv1有什么區(qū)別™ NbActiv4®?

NbActiv4®含有與NbActiv1相同的成分™ 加上固醇、雌激素和肌酸。NbActiv4®主要用作電生理介質(zhì)。

4.在對海馬培養(yǎng)物進行電鍍時,通常在NbActiv1中添加25μM氨酸鹽™ Neurobasic®/B27®/谷氨胺最大殘留量™) NbActiv4®Neurobasic®/B27®/GlustaMAX

/固醇/雌激素/肌酸)培養(yǎng)至第4天。氨酸的用途是什么?

它有助于海馬神經(jīng)元的發(fā)芽和提高生存能力。DIV4之后,應使用不含氨酸的培養(yǎng)基進行半培養(yǎng)基交換。

5.如果氨酸鹽被排除在外,會有問題嗎?

DIV4時,你的生存率會降低約30%

6.如果我在NbActiv1中平板細胞™ 我可以將介質(zhì)更改為NbActiv4®嗎?

是的,在文化中的任何時候,媒體都可以從NbAcitv1改變™ NbActiv4®。然而,事實并非如此。接種NbActiv4®的細胞不應改為NbActiv1.

7.我需要什么額外的用品來維持培養(yǎng)物?

每份訂單包括足夠的培養(yǎng)基,可以開始培養(yǎng)并維持45天。除此之外,您還需要更多的培養(yǎng)基,我們可以通過Invitrogen單獨提供完整的即用配方。您還需要您選擇的鍍膜玻璃或塑料基材,我們建議使用聚-D-賴氨酸作為基材。除此之外,您還需要解離溶液,我們推薦我們的木瓜蛋白酶和Hibernate®E-Ca以及火拋光移液管。我們將所有這些用品包含在我們的完整培養(yǎng)工具包中。

8.我應該在電鍍介質(zhì)中補充抗生素/抗真菌藥物嗎?例如:筆/鏈球菌/真菌唑還是大霉素?

我們通常在沒有抗菌抗生素和抗真菌藥物的情況下進行培養(yǎng),并取得了良好的成功。這有三個優(yōu)點:

首先,當出現(xiàn)污染時,更容易確定污染的來源。第二,如果你使用抗生素,當你感染時,很難擺脫。第三,抗生素已被證明可以激活神經(jīng)元中的癲癇樣爆發(fā)活動??股氐氖褂檬且环N常見的做法,其類型和濃度取決于最終使用者。

Hibernate®媒體

Hibernate®、Neurobasic®B27®僅用于研究目的,由Invitrogen公司生產(chǎn)。Hibernate®Neurobasic®B27®Invitrogen公司的商標。

1.Hibernate®媒體穩(wěn)定多長時間?

我們的Hibernate4攝氏度的黑暗中保存長達1年。為了防止氧化,介質(zhì)可以等分成更小的體積,并在4攝氏度下儲存。

2.你總是添加B27®GlutaMAX嗎™ Hibernate®,還是只在Hibernate®中保持細胞的活力?

幾乎總是這樣。請參閱BrewerPrice1996PM:8856709的圖1。在37℃的環(huán)境二氧化碳中,Neurobasic®/B27®/Gutamax中的LD50 24小時,而在Hibernate®/B27®/GutaMAX®中則超過3天。

3.我們可以提供定制的Hibernate配方嗎?

是的,我們可以提供Hibernate的自定義配方。

4.Hibernate的其他用途包括:

轉基因小鼠基因分型過程中的腦儲存。

將腦組織運送給合作者。

基底

1.我的神經(jīng)元更多地以細胞簇或團塊的形式生長,而不是孤立的。怎么了?

這意味著細胞與自身的粘附比與基質(zhì)的粘附更緊密。最有可能的問題是基板制備不良。將您的方案與聚-D-賴氨酸的推薦制備和基質(zhì)涂層進行比較。另一種可能性是鍍層密度可能過高。

2.關于聚-L-賴氨酸與聚-D-賴氨酸,我認為使用聚-D-賴氨酸是因為如果它分解為賴氨酸時,D賴氨酸就不能被細胞使用。這是真的嗎?

這就是理論。在一些早期研究中(Brain Res.494:651989)),我們發(fā)現(xiàn)差異不大。

3.一些研究人員使用聚乙烯亞胺(PEI)代替聚-D-賴氨酸(PDL)。一個比另一個有優(yōu)勢嗎?

PEIPDL便宜。我們在PEI方面沒有取得太大成功,但Mark Mattson在開始在Neurobasic®/10%血清中培養(yǎng)后一直在使用它。報告顯示,神經(jīng)元存活率或刺突率沒有顯著差異。

Soussou WV,Yoon GJ,Brinton RD,Berger TW2007)在表面處理的多電極陣列上培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的神經(jīng)元網(wǎng)絡形態(tài)和電生理學。IEEE跨生物識別工程54:1309-1320。下午:17605362

Brewer GJCotman CW1989)海馬神經(jīng)元在低密度特定培養(yǎng)基中的存活和生長:三明治培養(yǎng)技術或低氧的優(yōu)勢。腦研究494:65-74。下午:2765923。

預涂PDL培養(yǎng)皿

1.你能推薦任何品牌的預涂層組織培養(yǎng)瓶或制備用于初級神經(jīng)元生長的組織培養(yǎng)瓶的方法嗎?

我們已經(jīng)確定,細胞培養(yǎng)塑料或玻璃上的聚-D-賴氨酸涂層在涂層后開始失效。涂層玻璃片在14天后失效,涂層塑料在10天后失效。我們懷疑一些預涂板的工作效果令人滿意,但我們的經(jīng)驗是,有幾種預涂板會導致初級神經(jīng)元的粘附性和存活率差。因此,我們建議您涂覆自己的基底,并在一周內(nèi)或上述幾天之后使用。

2.你們銷售預涂文化用品嗎?

是的,我們銷售PDL涂層燒瓶、井板和卡瓦。我們在一夜之間給它們涂上涂層,第二天再發(fā)貨,以便隔夜送達。我們建議您在一周內(nèi)使用這些產(chǎn)品。

新鮮紙巾

1.你們提供什么年齡的紙巾?

我們的標準組織是胚胎第18天或孕婦(3-4個月大)的成年組織。所有其他組織年齡均可特殊訂購,交貨期為2-3周。

Wolburg H,Neuhaus J,Kniesel U,Krauss B,Schmid EM,Ocalan M,Farrell C,Risau W1994)血腦屏障內(nèi)皮細胞緊密連接結構的調(diào)節(jié)。組織培養(yǎng)、第二信使和共培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞的影響?!都毎茖W雜志》107(第5期):1347-1357頁。下午:1692329

Risau WEngelhardt B,Wekerle H1990)血腦屏障的免疫功能:

大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞的蛋白(自身)抗原。細胞生物學雜志110:1757-1766。下午:7929640關于從脊髓中分離運動神經(jīng)元的更多信息,M.Das、J.W.Rumsey、N.Bhargava、M.StancescuJ.J.Hickman。一種確定的神經(jīng)肌肉接頭的長期體外組織工程模型。生物材料3118):4880-48882010。下午:20346499

2.你保證每個小瓶有多少來自皮層和海馬體的神經(jīng)元?

海馬神經(jīng)元的數(shù)量保證為100萬,皮層神經(jīng)元的數(shù)量則保證為200萬。其他組織類型的數(shù)量不同。

3.有什么保證可以保證動物的大腦和脊髓組織是根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院批準的方案獲得的?

我們的動物方案233-08-013202074日獲得南伊利諾伊大學醫(yī)學院實驗動物護理和使用委員會的批準。

對于美國國立衛(wèi)生研究院的撥款,脊椎動物部分:

保證編號為A-3209-01。

F.脊椎動物

用于原代培養(yǎng)的海馬、皮層和其他大腦和脊髓神經(jīng)元將從胚胎或出生后早期的大鼠或小鼠的大腦中獲得。使用氟烷麻醉后,將對大腦進行解剖。戊比妥將用于大鼠的心臟。小鼠將在麻醉狀態(tài)下被送上斷頭臺或折斷頸部。這些樂死方法與美國獸醫(yī)協(xié)會樂死問題小組的建議一致。

通過從動物身上分離神經(jīng)元,可以研究比整個動物研究更多的實驗變量,從而減少對動物的需求。大鼠和老鼠的大腦是所有動物大腦中研究得好的。

平均住房需求估計為2天,足以讓嚙齒動物從交通創(chuàng)傷中恢復過來。動物將由SIUSM實驗動物醫(yī)學中心護理,該中心經(jīng)AALAC認證,有10名工作人員,由Helen Valentine,D.V.M.MS指導,經(jīng)DACLAM認證

使用氟烷麻醉后,將對大腦進行解剖。戊比妥將用于大鼠的心臟。小鼠將在麻醉狀態(tài)下被送上斷頭臺或折斷頸部。這些樂死方法與美國獸醫(yī)協(xié)會樂死問題小組的建議一致。因此,這些程序?qū)游锏氖褂孟拗圃谶M行有科學價值的研究時不可避免的范圍內(nèi),并將動物的不適、痛苦和痛苦降至低。

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